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EFECTO DEL ACETATO DE PLOMO SOBRE LA CAPACITACIóN
ESPERMÁTICA hUMANA
Roy Anderson1
Adriana Castillo 1
Mauricio Gonzales1
Flor de María Madrid2
RESUMEN
El plomo es un agente contaminante presente en el ambiente producto de la minería, manufactura industrial
y la quema de combustibles fósiles. Se ha observado que individuos expuestos ocupacionalmente a plomo
presentan disfunción de las glándulas sexuales, disminución de la concentración espermática, disminución de
la motilidad y algunas otras alteraciones.
El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del acetato de plomo sobre la capacitación espermática. El
medio que se utilizó para la capacitación fue Tyrode libre de Ca+, suplementado con Albumina de Bovino
y bajo concentraciones de Pb(CH3 a
. En
conclusión, el acetato de plomo Pb(CH32 tiene efectos, sobre la motilidad y vitalidad, disminuyendo los
porcentajes óptimos durante la capacitación espermática.
Palabras clave: Acetato de plomo, vitalidad, motilidad lineal.
ABSTRACT
Lead is a contaminant in the environment from mining, industrial manufacturing and burning fossil fuels. It
has been observed in individuals occupationally exposed to lead have sex gland dysfunction, decreased sperm
count, decreased sperm motility and some alterations.
The aim of this study was to evaluate the effect of lead acetate on sperm capacitation. The medium used for
the training was free Tyrode Ca + supplemented with Serica bovine albumin (BSA) for 30 minutes at 37 ° C,
of sperm motility and vitality pre and post training. Results were obtained as a decrease in the average vitality
percentage motility and vitality for optimal sperm capacitation.
Keywords: lead acetate, vitality, linear motility.
1 Laboratorio de Biotecnología y Fisiología Animal, Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Ricardo Palma.
2 Instituto de Recursos Naturales y Ecología, Universidad Ricardo Palma.
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INTRODUCCIóN
La contaminación es un problema real y muy
preo
cupante en nuestros tiempos. Entre los
contaminantes más comunes y peligrosos se
encuentra el Plomo (Pb), un metal tóxico que
también encontramos en forma natural, y que por
ser un elemento básico, no se puede disociar o
degradar. Existe un amplio espectro de productos
derivados del plomo, estos dejan a la población
expuesta a sus efectos nocivos para la salud,
quedando como única alternativa, la minimización
de su empleo y el control de las emisiones de éste
al medio ambiente
En el presente trabajo utilizaremos no el elemento
plomo exclusivamente, pues su toxicidad es tal que
al trabajar con semen directamente correríamos
el riesgo de matar a los espermatozoides con el
solo contacto de estos con el metal, sino con una
solución de Acetato de Plomo, la cual se encuentra
en una variedad de productos de uso cotidiano, de
forma aparentemente ¨inofensiva¨, como lo son las
pinturas, textiles, murales, tintes para el cabello en
la industria de la belleza, así como en juguetes para
los niños.
Por lo expuesto evaluaremos si al someter los
espermatozoides a diferentes concentraciones de
acetato de plomo, antes y después de su capacitación
sobre la capacitación espermática y su probable
repercusión en la salud reproductiva.
MATERIAL Y MÉTODOS
1. Recolección del eyaculado
Para llevar a cabo el análisis se recolectaron
3 muestras de eyaculado humano de donantes
diferentes de la Facultad de Ciencias Biológicas,
con un periodo de abstinencia sexual de 4 días,
además se tomaron datos como la edad, realización
de actividades físicas (deporte, artísticas, otros) para
determinar el estrés de la persona en cada uno de
los donantes y los valores del espermograma de los
cuales solo consideramos los índices microscópicos
entre los cuales se encuentra la concentración
espermática, la motilidad y la vitalidad.
Los valores a considerar como criterios de
1.5 a más mL, pH 7.2 – 7.8 concentración
cuales solo consideraremos vitalidad y motilidad
para esta investigación.
2. Preparación del Medio de Capacitación
Utilizamos una Solución Tyrode libre de Ca,
luego, adaptamos las cantidades de los reactivos
que obtuvimos desde 1000mL a 250 mL. Luego,
agregamos BSA a 125mL de nuestra Solución
Tyrode libre de Ca, teniendo en cuenta el agregar
20µg/dL.
3. Tratamiento del eyaculado.
A. Medición del pico de la hiperactividad
Se tomó un eyaculado de cada individuo y se
diluyó en el medio hasta lograr una concentración
Luego capacitamos estos espermatozoides con
BSA y realizamos el conteo de espermatozoides
hiperactivos a diferentes tiempos, hasta determinar
en cual encontramos un pico de espermatozoides
hiperactivos capacitados, el resultado se diò a los 30
minutos para los 3 donantes.
B. Determinación de las concentraciones
del Pb(Ch 3COO)2
Trabajamos con 3 diferentes concentraciones,
siguiendo lo indicado por Mendiola et al, pues
el semen, tomando este dato como nuestra primera
concentración, para luego realizar diluciones siendo
C. Evaluación de los efectos del Pb(Ch 3COO)2,
en muestras capacitadas (simulan exposición en
la mujer) y no capacitadas (simulan exposición
en el hombre).
Dividimos las muestras previamente diluidas en dos
grupos para el tratamiento con Pb(CH32:
a. Muestras no capacitadas
Del primer grupo se extrajo el eyaculado del indi-
viduo 1, se tomaron 3 alícuotas. A cada alícuota se
le agregó Pb(CH32, para lograr las concentra-
ciones anteriormente determinadas, y se dejó reac-
cionar durante 10 minutos. Así procedimos con las
muestras de los 2 individuos restantes. Luego agre-
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gamos a todas las muestras BSA para capacitar a
los espermatozoides y dejamos incubar durante el
tiempo determinado como pico de motilidad lineal
rápida que calculamos para cada individuo (30min).
Posteriormente realizamos el conteo de cada mues-
tra siguiendo los criterios de vitalidad y motilidad
lineal rápida.
b. Muestras capacitadas.
Del segundo grupo se extrajo el eyaculado del
individuo 1, se tomaron 3 alícuotas. A cada alícuota se
le agregò BSA para capacitar a los espermatozoides
y luego le agregamos Pb(CH32, para lograr
las concentraciones anteriormente determinadas.
Del mismo modo procedimos con las muestras de
los 2 individuos restantes y se dejó incubar durante
el tiempo determinado como pico de motilidad
lineal rápida que calculamos para cada individuo
(30min). Posteriormente realizamos el conteo de
cada muestra siguiendo los criterios de vitalidad y
motilidad lineal rápida.
D. Procesamiento de datos.
Los datos fueron recopilados y procesados,
primero, en función a sus parámetros descriptivos,
y luego por medio del programa SPSS 20.0, a los
comparando: para la Vitalidad, las relaciones entre
donantes VS las concentraciones de Pb(CH32
y para la Motilidad VS el comportamiento de las
muestras.
RESULTADOS
La media de espermatozoides incubados única-
mente con la solución Tyrode libre de Ca, sin ca-
interpretar estos datos diciendo que el BSA aumenta
la capacitación in vitro en nuestra muestra en aprox-
imadamente un 20%.
Luego al agregar Pb(CH32 en nuestra solución
en las distintas concentraciones ya calculadas
(
obtuvimos como medias C C2=
C3= 47.33 para las muestras no capacitadas
C1=
CC
capacitadas con BSA. Así, podemos entender en
estos datos, como en el primer grupo las medias
de vitalidad son considerablemente inferiores en
contraste con el segundo grupo.
De igual manera trabajamos con la motilidad
para las muestras control pre y post capacitadas
que la diferencia de motilidad lineal rápida si es muy
notoria en ambos grupos, pues està directamente
afectada por el BSA, siendo este tipo de motilidad
la que permite la fertilización.
lineal rápida a diferentes concentraciones de
Pb(CH32CCC3=
C C C
muestras capacitadas con BSA.
Estos datos nos indican el gran efecto que tiene
el Pb(CH32 sobre la motilidad de los
masculina.
En la Tabla 1 se puede observar la vitalidad y
motilidad lineal rápida de los espermatozoides
capacitados y no capacitados. Se aprecia la tendencia
hacia la disminución de la motilidad lineal rápida y
vitalidad respecto al aumento de la concentración
del Pb(CH32.
Tabla 1 Resumen de medidas para muestras capacita-
das y no capacitadas, con respecto a la vitalidad y a la
motilidad lineal rápida
[Pb(CH3COO)2] Vitalidad Motilidad
Lineal rápida
Sin capacitar
Control 61.6 13.33
0.66µg/dL 47.33 5.77
6.6µg/dL 28.99 3.43
66µg/dL 17.99 1.2
capacitados
Control 81.5 62.1
0.66µg/dL 70.86 49.66
6.6µg/dL 60.77 44.77
66µg/dL 46.09 26
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En la Tabla 2 se puede observar la variación de la vitalidad en función a la concentración de Pb(CH32
en tres distintos donantes. Al aumentar la concentración de Pb(CH32 disminuye la vitalidad de los
espermatozoides.
En la Tabla 3 se puede observar la variación de la motilidad lineal rápida en función a la concentración de
acetato de plomo en tres distintos donantes. Al aumentar la concentración de Pb(CH32 disminuye la
motilidad lineal rápida.
Para las muestras no capacitadas:
como el porcentaje de espermatozoides vivos disminuye a medida que va aumentando la concentración de
Pb(CH32.
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DISCUSIóN
espermatozoides vivos en las muestras de eyaculado
humano, en comparaciòn con nuestros resultados,
en los espermatozoides del grupo control no capa-
-
matozoides vivos.
concentración 1 afecta dramáticamente la motilidad
lineal rápida, y como se va aumentando esta, a
medida que se disminuye la concentración de
Pb(CH32.
-
matozoides con motilidad lineal rápida.
Para las muestras capacitadas:
alguna entre donantes, pero vemos como se com-
portan de manera similar frente al Pb(CH32,
en las concentraciones con las que se trabajò, obser-
vando la misma tendencia a la caída dramática de la
vitalidad con las concentraciones permitidas.
70 00
60 00
50 00
40 00
30 00
20 00
10 00
Concentración de Pb(CH32
Donante 1
Donante 2
Donante 3
Donante
Medias marginales estimadas
Concentración de Pb(CH32
20,00
15,00
10,00
5,00
,00
Medias marginales estimadas
Donante
Donante 1
Donante 2
Donante 3
-
matozoides vivos.
los donantes (eyaculados) en relación a las
concentraciones decrecientes de Pb(CH32con
las que trabajamos, y como estas afectan de manera
más puntual la motilidad lineal rápida.
-
matozoides con motilidad lineal rápida.
Medias marginales estimadas
100,00
80,00
60,00
40,00
20,00
Donante
Donante 1
Donante 2
Donan-te 3
Concentración de Pb(CH32
Medias marginales estimadas
80 00
60 00
40 00
20 00
Donante
Concentración de Pb(CH32
Donante 1
Donante 2
Donante 3
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CONCLUSIONES
El incremento de las concentraciones de
-
tilidad lineal rápida en espermatozoides capacita-
dos y no capacitados.
los distintos eyaculados evaluados.
-
zoides humanos, afectando la capacitación esper-
mática.
Los espermatozoides son buenos bioindicadores
citados, esto puede deberse a la dieta, a la actividad
física que hayan realizado u otros factores externos.
-
go de 3 a 20% de espermatozoides con motilidad
lineal rápida en las muestras de eyaculado humano,
coincidiendo con nuestros resultados en los que ob-
tuvimos como media 13,33% en los espermatozoi-
des del grupo control no capacitados, lo cual indica
que el valor se encuentra dentro de un rango esta-
blecido a nivel mundial.
Los resultados que muestran disminución de la
vitalidad y motilidad lineal rápida se sustentan en
investigaciones como las de Huidobro que en el
2010, expuso las causas de la infertilidad masculi-
aspectos toxicológicos entre los cuales encontramos
al Pb como uno de los principales metales pesados
causantes de este mal. Cabe señalar además, que
-
mo en semen como valor máximo en profesionales
expuestos. Asì como también se corrobora con los
resultados obtenidos por Méndez en el 2012.
Considerando que la capacitación espermática in
vivo, se genera en el oviducto femenino y si se
reúnen las condiciones que hemos simulado in vitro
en el laboratorio, podemos inferir que los resulta-
dos obtenidos en esta investigación puedan coin-
cidir con la contaminación por acetato de plomo
-
traciones similares en donde el eyaculado que este
produzca, disminuirá considerablemente la vitali-
dad y motilidad de sus espermatozoides. Coinci-
en el 2008, revelando que la exposición crónica al
plomo en el varón incluye reducción de la libido,
alteración en la espermatogénesis, dando como re-
sultado una disminución en las tasas de fertilidad.
REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
ASTETE
2005. Determinación de plomo en sangre y fac-
tores asociados en niños y mujeres gestantes de
las poblaciones Quiulacocha y Champamarca
Cerro de Pasco. Min. Salud. Serie de Informes
Ltd. 1980.
, T., Noonan, E., Eckardstein, S., Auger,J.,
Baker, H., Behre, H., Haugen A, T., Kruger,T.,
y moleculares de la capacitación espermática.
, C. 2010. Infertilidad Masculina. Rev.
MENDEZ
na,
P. 2012. Efecto de la exposición in vitro de esper-
from the Experimental Faculty of Sciences, at the
-
pesados y calidad seminal en humano. Revisio-
, A. 2009. Espermograma. Medicina & La-
, G. 2009. Fisiología de la reproduc-
ción humana. Revista Mexicana de Medicina de
NTI
The molecular basis of sperm capacitation. Jour-
nal of Andro
logy, Vol. 19, N°2, 242-248 p.
2008. Exposición ocupacional a plomo y pes-
ticidas organofosforados: efecto sobre la salud
reproductiva masculina. Revista Peruana de
394-402 p.
